| 制品内容 （250 U） |
| Fast Pfu DNA聚合酶（5 U/μl） | 50 μl | | dNTP 混合液 （各10 mM） | 250 μl | | 5 × Fast Pfu Buffer with Mg2+ | 2000 μl | |
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| · 制品说明 |
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| Pfu DNA聚合酶为zui常用的高保真DNA聚合酶，在需高保真的PCR反应中广范使用,然而Pfu酶扩增灵敏度不高，延伸速度缓慢（0.5kb/分钟）给众多的使用者带来了不便。针对普通Pfu酶的以上缺点，SinoBio采用分子进化技术对普通Pfu酶进行改造，制备的新型聚合酶Fast Pfu酶具有快速、高灵敏度、抗干扰能力强等特点，是新一代的高保真DNA聚合酶。使用Fast Pfu能获得更理想的扩增结果，并大幅度缩短扩增反应时间。 | | | |
| · 用 途 |
| 用于要求保真度比较高的PCR反应，包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突变、全基因合成等（参见 SinoBio 实验方案）。 |
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| · 产品特点 |
高保真：具有同Pfu酶相同的保真度，为普通Taq酶的10倍。
快速：Fast Pfu扩增速度为普通Pfu酶的数倍，72℃保温30秒可延伸1kb以上。
高效：以λDNA为模板，扩增长度可达12kb，能高效扩增≤6kb片段；对于人基因组DNA等复杂模板，能有效扩增出3kb特定基因片段。
*配方的5×Buffer：使PCR扩增反应更加稳定、灵敏、高效。 |
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| · 质量保证 |
| 经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。 |
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| · 使用建议 |
Fast Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平滑末端，无3’端"A"突出， 其PCR产物的克隆有两种方案：
1.PCR前引物进行5’端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平滑末端的载体中（参见 Sinobio 实验方案）。
2.将产物3’末端加A后再与T-Vector连接（参见 SinoBio 实验方案）。
*由于Fast Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3′端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度，理想的引物长度为 20-30碱基。另外为了减少由3′-5′外切酶活性引起的引物降解， 尽量在冰上配置反应体系，并zui后加入Fast Pfu酶。。
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